Methoden zur Untersuchung von Leukozyten im Blut. Leukozyten (Leukozyten)

01.07.2020

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Prinzip. Zählen von Leukozyten während der Mikroskopie in einer bestimmten Anzahl von Quadraten der Zählkammer und Berechnung ihrer Anzahl in 1 Liter Blut unter Berücksichtigung der Blutverdünnung und des Volumens der Zählkammer.

Reagenz: 3-5%ige Essigsäurelösung, getönt, um die Kerne von Leukozyten mit einigen Tropfen Methylenblaulösung anzufärben. Die Lösung hat eine blaue Farbe und kann lange gelagert werden.

Definitionsfortschritt. Gießen Sie 0,4 ml Essigsäurelösung in ein trockenes Reagenzglas. 0,02 ml Blut werden einem Finger entnommen (venöses Blut, stabilisiert mit einem Antikoagulans, kann verwendet werden). Spitze der Pipette abwischen, dann Blut aus der Pipette auf den Boden des Reagenzglases blasen, durch mehrmaliges Sammeln und Ausblasen der Mischung aus Blut und Reagenz mischen (pipettieren). Beschriften Sie das Röhrchen und lassen Sie es bis zum Zählen stehen. Es wird empfohlen, eine Blutmischung mit einer Essigsäurelösung nicht länger als 2-4 Stunden aufzubewahren.

In einem Reagenzglas mit Essigsäure verdünntes Blut wird gründlich gemischt und die Zählkammer damit gefüllt. Die gefüllte Kammer wird für 1 min zur Leukozytensedimentation in horizontaler Position belassen. Leukozyten werden in 100 großen Quadraten gezählt, was 1600 kleinen entspricht, ohne die horizontale Position der Kamera zu verändern.

Für eine größere Genauigkeit werden Leukozyten über das gesamte Raster in großen Quadraten gezählt, nicht in kleine Quadrate und Streifen unterteilt, beginnend an der oberen linken Ecke des Rasters. Für einen besseren Kontrast wird das Gesichtsfeld abgedunkelt, indem der Kondensor abgesenkt und die Blende geschlossen wird. Zellen, die sich innerhalb des Quadrats befinden und auf zwei beliebigen Linien liegen, werden gezählt, damit dieselbe Zelle nicht zweimal gezählt wird.

Die Berechnung der Leukozytenzahl erfolgt nach der Formel:

wobei X die Anzahl der Leukozyten in 1 µl Blut ist; a - die Anzahl der Leukozyten in 100 großen Quadraten; 20 - Blutverdünnung; 100 - die Anzahl der großen Quadrate; 250 ist der Umrechnungsfaktor pro 1 µl, da das Volumen eines großen Quadrats 1/250 µl beträgt (die Seite des Quadrats beträgt 1/5 mm, die Höhe 1/10 mm).

In der Praxis wird zur Berechnung der Anzahl der Leukozyten in 1 μl Blut ihre Anzahl in 100 großen Quadraten mit 50 multipliziert, und in 1 Liter wird der resultierende Wert mit 106 multipliziert.

Notiz. Bei der Leukozytenzählung ist in 6-8% der Fälle ein Fehler unvermeidlich.

Fehlerursachen.

Bei einer großen Anzahl von Normozyten im peripheren Blut werden sie zu den Leukozyten gezählt (sowohl Leukozyten als auch Normozyten sind kernhaltige Zellen). Um die Anzahl der Leukozyten korrekt zu bestimmen, sollte die Anzahl der Normozyten von der Gesamtzahl der kernhaltigen Blutkörperchen abgezogen werden.
Die verbleibenden Fehler ähneln denen, die beim Zählen der Erythrozytenzahl in der Zählkammer auftreten.

Die Anzahl der Leukozyten im Blut hängt sowohl von der Geschwindigkeit ihrer Bildung und ihrer Mobilisierung aus dem Knochenmark als auch von ihrer Verwendung und Migration in Gewebe (in Läsionen) ab, Aufnahme durch Lunge und Milz. Diese Prozesse wiederum werden von einer Reihe physiologischer Faktoren beeinflusst, weshalb die Zahl der Leukozyten im Blut eines gesunden Menschen Schwankungen unterliegt: Sie steigt gegen Ende des Tages mit an physische Aktivität, emotionaler Stress, Proteinaufnahme, eine starke Änderung der Umgebungstemperatur.

Quantifizierung von Leukozyten

Leukozyten werden mit einer Goryaev-Kamera und mit automatischen Zählern gezählt.

Leukozytenzählung mit Goryaevs Kamera

Bei der Reagenzglas-Blutentnahme zur Leukozytenzählung:

In ein Reagenzglas werden 0,4 ml einer mit Methylenblau eingefärbten Lösung von 3-5 % Essigsäure gegossen. Mit einer Kapillarpipette werden einem frischen Tropfen 20 µl Blut entnommen (20-fache Verdünnung), vorsichtig in ein Reagenzglas geblasen und die Pipette gespült. Die Mischung wird gut gerührt;
ein sauberes und trockenes Deckglas wird gegen die Kammer gerieben, so dass sich an der Kontaktstelle schillernde Ringe bilden;
Das im Reagenzglas verdünnte Blut wird gut gemischt. Mit dem Ende eines runden Glasstabes wird ein Tropfen Blut entnommen und an den Rand des Mattglases der Kammer gebracht;
nach Befüllen der Kammer wird diese zur Leukozytensedimentation 1 min ruhen gelassen;
Zählen Sie Leukozyten bei geringer Vergrößerung (Linse ×8 oder ×9, Okular ×10 oder ×15) mit abgedunkeltem Gesichtsfeld (bei abgesenktem Kondensor oder verengter Blende);
Um zufriedenstellende Ergebnisse zu erhalten, werden Leukozyten in 100 großen Quadraten gezählt.

Wenn Sie das Volumen des großen Quadrats und den Grad der Blutverdünnung kennen, ermitteln Sie die Anzahl der Leukozyten in 1 μl und 1 Liter Blut. Die Seite des großen Quadrats beträgt 1/5 mm, die Fläche 1/25 mm2, das Raumvolumen über diesem Quadrat 1/250 mm3.

Formel zum Zählen von Leukozyten:

wobei B die Anzahl der Leukozyten in 100 großen Quadraten ist;
P - Verdünnungsgrad (20).

Quantitativer Gehalt an Leukozyten

Norm: 4,0–9,0 × 10 9 /L

Ein Anstieg der Leukozytenzahl über 9,0 × 10 9 / l wird genannt
Leukozytose, eine Abnahme ihrer Anzahl unter 4,0 × 10 9 /l - Leukopenie. Jedoch können sogar 3,5 × 10 9 in 1 Liter Leukozyten für eine Reihe von Individuen die Norm sein. Laut Literatur haben solche Menschen eine erhöhte Immunresistenz und werden seltener krank, was anscheinend durch die Notwendigkeit der Umsetzung von Immunreaktionen erklärt wird, um eine Reserve von Leukozyten in Geweben zu haben, wo es 50–60 gibt Mal mehr davon als im Blutkreislauf. Offensichtlich sind gerade bei gesunden Menschen mit niedrigem Leukozytengehalt im peripheren Blut ihre Gewebevorräte entsprechend erhöht. Dieses Phänomen wird durch eine erblich-familiäre Natur oder eine Zunahme des Einflusses des parasympathischen Nervensystems erklärt.

Leukopenie kann funktionell und organisch sein.
Funktionelle Leukopenie ist mit einer Dysregulation der Hämatopoese verbunden und wird beobachtet:

mit einigen bakteriellen und viralen Infektionen (Typhus, Grippe, Pocken, Röteln, Botkin-Krankheit, Masern);
unter Aktion Medikamente(Sulfonamide, Analgetika, Antikonvulsiva, Thyreostatika, Zytostatika und andere Medikamente);
bei Muskelarbeit, Einschleusung eines fremden Eiweißes, Nerven- und Temperatureinflüsse, Hunger, Hypotonie;
falsche Leukozytopenie kann mit der Aggregation von Leukozyten während der Langzeitlagerung von Blut in Verbindung gebracht werden Zimmertemperatur(mehr als 4 Stunden).

Organische Leukopenie, die aus einer Aplasie des Knochenmarks und seinem Ersatz durch Fettgewebe resultiert, tritt auf, wenn:

Aplastische Anämie;
Agranulozytose;
leukopenische Form von Leukämie;
einige Formen der Lymphogranulomatose;
ionisierende Strahlung;
Hypersplenismus (primär und sekundär);
Kollagenosen.

Leukozytose

Leukozytose ist eine Reaktion des hämatopoetischen Systems auf Exposition gegenüber
exogene und endogene Faktoren. Es gibt physiologische und pathologische Leukozytose.

Physiologische Leukozytose ist:

verdauungsfördernd - nach dem Essen, besonders reich an Proteinen; die Anzahl der Leukozyten übersteigt 10,0–12,0 × 10 9 /l nicht und kehrt nach 3–4 Stunden zum Normalwert zurück;
bei emotionalem Stress (Ausschüttung von Adrenalin), starker körperlicher Anstrengung, Auskühlung, übermäßiger Sonneneinstrahlung ( Sonnenbrand), die Einführung einer Reihe von Hormonen (Katecholamine, Glukokortikosteroide usw.), in der zweiten Hälfte der Schwangerschaft, während der Menstruation und ist auf eine ungleichmäßige Verteilung von Leukozyten im Blutkreislauf zurückzuführen.

Die pathologische Leukozytose wird in absolute und relative unterteilt.

Absolute Leukozytose- eine Erhöhung der Leukozytenzahl im Blut auf mehrere Hunderttausend (100,0–600,0 × 10 9 /l und mehr).

Am häufigsten bei Leukämie beobachtet: bei chronischer Leukämie - in 98-100% der Fälle mit Akute Leukämie- in 50-60%. Die Veränderung des Verhältnisses von Leukozytenzellen im Knochenmarkpunktat und im Blut dient als Grundlage für die Diagnose einer Leukämie.

Relative Leukozytose beobachtet:

bei akuten entzündlichen und infektiösen Prozessen, mit Ausnahme von Typhus, Influenza, Pocken, Röteln, Botkin-Krankheit, Masern. Die größte Leukozytose (bis 70,0–80,0 × 10 9 /l) wird bei Sepsis beobachtet;
unter dem Einfluss toxischer Substanzen (Insektengifte, Endotoxine), ionisierender Strahlung (unmittelbar nach der Exposition);
als Folge der Wirkung von Kortikosteroiden, Adrenalin, Histamin, Acetylcholin, Digitalispräparaten;
mit Gewebeabbau (Nekrose), Myokardinfarkt, Thrombose peripherer Arterien mit Gangrän, Verbrennungen, exsudativer Pleuritis, Perikarditis, Urämie, Leberkoma;
erheblicher Blutverlust bei Wunden, inneren, gynäkologischen und anderen Blutungen.

Eine Erhöhung der Anzahl von Leukozyten mit Infektionskrankheiten in den meisten Fällen geht sie mit einer Verschiebung der Leukozytenformel nach links einher

Faktoren, die die Richtigkeit der Untersuchung von Leukozyten beeinflussen

Kryoglobulinämie

Paraproteinämie

Normoblasten

Blutplättchenaggregate

Unlysierte Erythrozyten

Langzeitlagerung von Blut bei Raumtemperatur

Alter WBC-Zählung

1 Tag 11.6 - 22.0

1 Woche 8.1.- 14.3

1 Monat 7.6 – 12.4

1 Jahr 6,8 - 11,0

Erwachsene 4,0 – 9,0

Methoden zur Bestimmung der Anzahl von Leukozyten im Blut.

Zählen der Leukozytenzahl in der Zählkammer

Leukozytenzahl in Hämatologie-Analysatoren

Bestimmung der Leukozytenzahl in der Zählkammer.

Die Auszählung der Leukozyten unter dem Mikroskop wird nach Lyse der Erythrozyten in 100 großen Quadraten des Zählgitters durchgeführt und anhand des Volumens der Quadrate und der Blutverdünnung auf 1 Liter Blut umgerechnet. Die Leukozytenzählung sollte innerhalb von 2-4 Stunden nach der Blutentnahme erfolgen.

Wenn im peripheren Blut rote kernhaltige Blutkörperchen vorhanden sind, werden sie nicht lysiert und zusammen mit den Leukozyten gezählt. In diesem Fall wird zur Bestimmung der wahren Leukozytenzahl die Anzahl der Zellen in der roten Reihe von der Gesamtzahl der gezählten Zellen abgezogen.

Beispiel: Die Gesamtzahl der Leukozyten bei der Zählung in der Kammer (oder auf dem Analysator) beträgt 45x109/l. Bei der Berechnung der Leukozytenformel wurde festgestellt, dass auf 100 Leukozyten 50 Erythroblasten (Normoblasten) kommen.

Wir berechnen die wahre Anzahl der Leukozyten im Blut:

150 Zellen - 45 x 109/l

100 Zellen (Leukozyten) - X

X \u003d 100 * 45 * 10 / l / 150 \u003d 30 * 10 / l

Somit beträgt die wahre Anzahl von Leukozyten im Blut 30 x109 / l.

Die Hauptfehlerquellen bei der Leukozytenzählung in der Kammer sind:

Falsches Verhältnis von Blut- und Essigsäurevolumen in einem Reagenzglas.

Falsch zubereitete Essigsäurelösung (bei einer Konzentration von mehr als 5 % können einige der Leukozyten lysiert werden, was zu einer Unterschätzung des Ergebnisses führt).

Längere Exposition der Probe bei Temperaturen über 28 °C, was die Lyse von Leukozyten in der Probe beschleunigen und zu einer Unterschätzung des Ergebnisses führen kann.

Falsche Füllung der Goryaev-Kammer. Wie bei der Erythrozytenzählung muss die Kammer für 1 Minute belassen werden, damit sich die Zellen absetzen können.

Unzureichend gut gewaschen nach der vorherigen Bestimmung, Goryaevs Kammer. In der Kammer verbleibende weiße Blutkörperchen können die Ergebnisse der Analyse überschätzen.

Thrombozytenzählmethoden

In der Zählkammer

Blutausstriche

Hämatologisches Analysegerät

Jede Gruppe von Methoden hat Vor- und Nachteile.

Die Thrombozytenzahl in der Kammer ist ziemlich genau, erfordert keine Berechnung der Anzahl der roten Blutkörperchen. Andererseits ist diese Methode arbeitsaufwändiger, da Blutplättchen in ihrer nativen Form kleine und schlecht kontrastierte Elemente sind. Der Nachteil der Methode ist die Zählung der Blutplättchen in den nächsten Stunden nach der Blutentnahme.

Die Bestimmung der Thrombozytenzahl in Blutausstrichen ist der Kammermethode oder automatischen Zählern in der Genauigkeit deutlich unterlegen. Zählfehler bei Blutausstrichen können auf eine schlechte Abstrichqualität und die damit verbundene ungleichmäßige Verteilung der Blutplättchen, eine ungenaue Bestimmung der Anzahl der roten Blutkörperchen zurückzuführen sein. Ein erheblicher Nachteil des Verfahrens ist die Notwendigkeit des gleichzeitigen Zählens von Blutplättchen und Erythrozyten im Blut. Sein Vorteil ist die Möglichkeit, Blutplättchen jederzeit zu untersuchen, unabhängig vom Zeitpunkt der Blutentnahme.

Die Methode zur Bestimmung von Blutplättchen mit einem hämatologischen Analysegerät ermöglicht es Ihnen, die Anzahl der Blutplättchen, ihr durchschnittliches Volumen und ihre Verteilung nach Volumen genau zu bestimmen.

Dendrit.ru

Zählen von Leukozyten in einer Zählkammer

Reagenz: 3-5%ige Essigsäurelösung, getönt, um die Kerne von Leukozyten mit einigen Tropfen Methylenblaulösung anzufärben. Die Lösung hat eine blaue Farbe und kann lange gelagert werden.

Die Berechnung der Leukozytenzahl erfolgt nach der Formel:

In der Praxis wird zur Berechnung der Anzahl der Leukozyten in 1 μl Blut ihre Anzahl in 100 großen Quadraten mit 50 multipliziert, und in 1 Liter wird der resultierende Wert mit 106 multipliziert.

Notiz. Bei der Leukozytenzählung ist in 6-8% der Fälle ein Fehler unvermeidlich.

Fehlerursachen.

Bei einer großen Anzahl von Normozyten im peripheren Blut werden sie zu den Leukozyten gezählt (sowohl Leukozyten als auch Normozyten sind kernhaltige Zellen). Um die Anzahl der Leukozyten korrekt zu bestimmen, sollte die Anzahl der Normozyten von der Gesamtzahl der kernhaltigen Blutkörperchen abgezogen werden.
Die verbleibenden Fehler ähneln denen, die beim Zählen der Erythrozytenzahl in der Zählkammer auftreten.

Siehe auch:

Leukozytenzahl in einem Hämatologie-Analysator (automatischer Zähler)

onlab.info

Bestimmung der Leukozytenzahl

Startseite / Nachschlagewerk für die klinische Labordiagnostik / Blutuntersuchungen / Leukozyten / Bestimmung der Leukozytenzahl

Methode der Kammerzählung

Entnahme und Verdünnung von Blut nach der Reagenzglasmethode. 0,4 ml Verdünnungsflüssigkeit und 0,02 ml Kapillarblut werden in ein Reagenzglas (vorzugsweise Vidalevsky) gegeben. Die resultierende Verdünnung wird praktisch als 1: 20 angesehen. Als Verdünnungsflüssigkeit wird normalerweise eine 3-5% ige Lösung von Essigsäure verwendet, die mit Methylenblau gefärbt ist (Essigsäure lysiert Erythrozyten, Methylenblau färbt die Kerne von Leukozyten). Vor dem Befüllen der Goryaev-Kammer wird das Reagenzglas mit verdünntem Blut gründlich geschüttelt. Die Befüllung der Kammer erfolgt wie beim Zählen der Erythrozyten.

Es gibt viel weniger Leukozyten als Erythrozyten (1-2 pro großes Quadrat), daher erfolgt die Zählung aus Gründen der Genauigkeit in 100 großen Quadraten (nicht markiert).

Berechnung: Leukozyten wurden in 100 großen Quadraten (1600 kleinen) gezählt. Wenn man sich daran erinnert, dass das Volumen eines kleinen Quadrats 1/4000 mm3 beträgt und das Blut 20-mal verdünnt wird, wird die Anzahl der Leukozyten in 1 μl Blut berechnet: 4000 * 20 und geteilt durch 1600 = a * 1/2. Um den tatsächlichen Leukozytengehalt in 1 μl Blut zu erhalten, reicht es in der Praxis aus, die bei der Berechnung erhaltene Zahl zu halbieren und 2 Nullen zuzuweisen. Der durchschnittliche Fehler der Methode beträgt ± 7 %.

Genauer (Fehler 2-3%) und perfekter ist die Leukozytenzählung mit elektronischen Geräten. Die Zählung von Leukozyten in Partikelzählern erfolgt nach dem gleichen Prinzip wie bei Erythrozyten. Das Blut wird vorläufig verdünnt und mit etwas Erythrozyten-lysierendem Reagenz gemischt. Im Technikon-Autoanalyzer wird eine Essigsäurelösung als solche verwendet, in den Coulter- und Celloscope-Geräten Saponin oder Sapoglobin, die verdünnt (1: 500, 1: 700) in einer isotonischen Natriumchloridlösung (6 Tropfen pro 20 ml) zugegeben werden Zucht).

www.medkurs.ru

Leukozytenzahl und Leukozytenformel.

Zur Leukozytenzählung wird Blut in Mixern oder in Reagenzgläsern verdünnt. Zu diesem Zweck wird eine 3-5% ige Essigsäurelösung (zur Zerstörung von Erythrozyten) verwendet, die mit einer Art Anilinfarbstoff getönt ist (zur Färbung der Leukozytenkerne). Das Zählgitter wird wie bei der Erythrozytenzählung gefüllt. Leukozyten werden in 100 großen Quadraten gezählt. In Goryaevs Raster ist es bequem, sie in unbegrenzten Quadraten zu zählen (es gibt 100 von ihnen im Raster). Ausgehend von der Blutverdünnung und dem Flüssigkeitsvolumen über den Quadraten wird ein konstanter Multiplikator berechnet. Bei 20-facher Verdünnung sind es 50.

Beim Arbeiten mit Reagenzgläsern werden zunächst 0,38 ml Flüssigkeit hineingegossen und 0,02 ml Blut darin freigesetzt. Für die Zählung in automatischen Zählröhrchen werden Erythrozyten mit Saponin hämolysiert. Der normale Leukozytengehalt beträgt 4,3 109-11,3 109 / l oder 4300-11 300 in 1 μl Blut.

Die Leukozytenformel wird in gefärbten Ausstrichen gezählt.

Ein guter Abstrich erfüllt folgende Anforderungen: er ist dünn, und die geformten Elemente liegen darin in einer Schicht; In diesem Fall ist der Ausstrich gelb und durchscheinend. Ein guter Ausstrich ist gleichmäßig und die Zellen werden durch das Ausstreichen nicht beschädigt. Damit sich das Blut in einer gleichmäßigen Schicht auf dem Glas absetzt, wird es durch Einbrennen über einer Flamme entfettet. Gasbrenner oder in einer Mischung aus Alkohol und Äther aufbewahrt. Das Ende des Glases wird mit einem frisch freigesetzten kleinen Blutstropfen berührt und ohne Verzögerung auf das Glas geschmiert. Vor dem Anfärben wird der Ausstrich durch Eintauchen in Methanol für 3 Minuten, in Ethylalkohol oder dessen Mischung mit Ether für 30 Minuten fixiert. Es gibt auch eine Reihe anderer Befestigungselemente. Nach der Fixierung getrocknet, wird der Ausstrich mit Farbstoff gefüllt.

Zur Unterscheidung von Blutzellen (Bestimmung der Leukozytenformel) greifen sie auf Differenzfärbungen zurück. Am weitesten verbreitet ist die Romanovsky-Giemsa-Färbung. Dieser Farbstoff ist eine Mischung aus leicht sauren (Eosin) und leicht alkalischen (Azur II) Farben. Zellen und ihre Teile nehmen je nach Reaktion der Umgebung in ihnen die eine oder andere Komponente des Farbstoffs wahr: Saure (basophile) Substanzen werden mit Azur blau gefärbt, alkalische (oxyphile) werden mit Eosin rot gefärbt; Neutrale nehmen beide Farben an und werden lila.

Die Leukozytenformel heißt Prozentsatz einzelne Formen von Blutleukozyten.

Hinweis: Für eine ziemlich genaue Berechnung müssen Sie sich mindestens 200 Leukozyten ansehen.

Die Zählung erfolgt mit einem Tauchsystem. Aufgrund der ungleichmäßigen Verteilung der Zellen im Ausstrich (die größeren gehen an die Ränder), ist es wichtig, eine solche Bewegungsreihenfolge entlang des Ausstrichs einzuhalten, bei der dessen Ränder und Mitte gleichermaßen sichtbar wären. Es wird eine von zwei Bewegungsmethoden verwendet: Gemäß einer davon wird der Strich von der oberen Kante zur unteren Kante bewegt, 2-3 Sichtfelder entlang der Kante bewegt, dann in die entgegengesetzte Richtung zur oberen Kante bewegt usw Bei der zweiten Methode bewegen sie sich vom Rand um 5 -6 Felder bis zur Mitte des Strichs, dann die gleiche Anzahl zur Seite, dann zurück zum Rand, bewegen sich einige Felder zur Seite und wiederholen die Bewegung erneut bis 50 Zellen werden gezählt. 4 solcher Bereiche werden an 4 Ecken des Ausstrichs betrachtet. Nach dem Zählen von 200 Zellen wird die Zahl halbiert und die Zahl jedes Leukozytentyps bestimmt.

Leukozyten sind Elemente des Blutes, die schnell auf verschiedene reagieren äußere Einflüsse und Veränderungen im Körper. Die Bestimmung der Gesamtzahl der Leukozyten kann von großem diagnostischem Wert sein, da sie Aufschluss über den Zustand der blutbildenden Organe oder deren Reaktion auf schädliche Einwirkungen gibt. Eine Zunahme der Anzahl von Leukozyten - Leukozytose - ist das Ergebnis der Aktivierung der Leukopoese, eine Abnahme ihrer Anzahl - Leukopenie - kann von der Hemmung hämatopoetischer Organe, ihrer Erschöpfung und dem erhöhten Zerfall von Leukozyten unter der Wirkung von Antileukozyten-Antikörpern abhängen 1. Neutrophile. Die variabelste Gruppe von Leukozyten sind Neutrophile, deren Anzahl mit vielen Infektionen, Intoxikationen und Gewebeabbau zunimmt.

Charakteristisch für die aktive Neutropoese ist nicht nur eine Zunahme der Gesamtzahl der Neutrophilen im Blut, sondern auch das Auftreten unreifer Formen darin: Die Anzahl der Stichzellen nimmt zu, junge Neutrophile treten auf, manchmal sogar Myelozyten. Diese "Verjüngung" der Zusammensetzung der Neutrophilen wird als Verschiebung der Leukozytenformel nach links bezeichnet. Die schützende Rolle von Neutrophilen wird durch ihre phagozytische Funktion, bakterizide Wirkung und die Freisetzung von proteolytischen Enzymen bestimmt, die die Resorption von nekrotischem Gewebe und die Wundheilung fördern.

Am häufigsten tritt eine regenerative Verschiebung bei Vorhandensein eines entzündlichen Prozesses oder Nekroseherdes auf. Eine sehr scharfe Verschiebung nach links zu Promyelozyten und sogar Myeloblasten mit signifikanter Leukozytose wird als leukämoide Reaktion bezeichnet. Eine Abnahme der Anzahl von Neutrophilen - absolute Neutropenie - tritt auf, wenn das Knochenmark durch die Wirkung von Toxinen bestimmter Mikroorganismen (Erreger von Typhus, Brucellose usw.) und Viren, ionisierender Strahlung und einer Reihe von Medikamenten unterdrückt wird.

2. Lymphozyten. Lymphozytose wird während der Erholungsphase von akuten Infektionskrankheiten mit infektiöser Mononukleose, infektiöser Lymphozytose, Lymphozytose, Röteln, Brucellose, Thyreotoxikose beobachtet.

Absolute Lymphopenie tritt bei Strahlenkrankheit, systemischen Läsionen des Lymphapparates auf: Lymphogranulomatose, Lymphosarkom.

3. Eosinophile. Sie werden im Blut in relativ geringer Menge gefunden (hauptsächlich in den Geweben enthalten), aber ihre Zahl nimmt bei allergischen Prozessen (Serumkrankheit, Bronchialasthma), Wurminfektionen und juckenden Dermatosen zum Teil erheblich zu.

Bei Sepsis wird eine Abnahme der Anzahl der Eosinophilen - Eosinopenie - bis zu ihrem vollständigen Verschwinden beobachtet. schwere Formen Tuberkulose, Typhus, schwere Vergiftung.

4. Basophile. Sie sind Träger wichtiger Mediatoren des Gewebestoffwechsels (Blut-„Äquivalente“ von Mastgewebszellen). Mit der Sensibilisierung des Körpers nimmt ihre Zahl zu, mit der wiederholten Einführung des Allergens nimmt sie infolge ihres Zerfalls stark ab.

5. Monozyten. Eine Zunahme der Anzahl von Monozyten - Monozytose - ist ein Indikator für die Entwicklung von Immunprozessen. Monozyten werden als Analoga von Gewebemakrophagen erkannt. Monozyten werden bei einer Reihe von chronischen Krankheiten (Chroniosepsis, Tuberkulose, Syphilis) gefunden. Monozytopenie wird manchmal bei schweren septischen, hypertoxischen Formen von Typhus beobachtet.

Agranulozyten. Unterscheidungsmerkmal Agranulozyten sind nicht segmentierter Kern und basophiles (blaues) Zytoplasma.

Lymphozyten sind die kleinsten weißen Blutkörperchen. Der Kern ist rund, oval oder bohnenförmig; nimmt den größten Teil der Zelle ein, intensiv gefärbt. Das Zytoplasma der meisten Lymphozyten umgibt den Kern mit einem schmalen Rand, ist hellblau gefärbt und wird zum Kern hin klarer.

Monozyt ist die größte der Blutzellen. Ein großer Kern von unregelmäßiger Form und relativ heller Farbe. Das Zytoplasma ist graublau, rauchig und klärt sich nicht bis zum Kern auf

Abgesehen von diesen Zellen sind Plasmazellen in normalem Blut selten, und bei Krankheiten können Plasmazellen häufig gefunden werden. Sie zeichnen sich durch einen exzentrisch angeordneten dichten Kern aus, der oft eine radförmige Struktur aufweist. Die Anzahl dieser Zellen nimmt bei einigen Infektionskrankheiten, Wundsepsis und multiplem Myelom zu.

Bei der Berechnung der Leukozytenformel wird nicht nur auf quantitative Änderungen, sondern auch auf qualitative Änderungen der Formelemente geachtet. Zuvor wurden degenerative Veränderungen in Leukozyten festgestellt. Bei schwerer Intoxikation wird die Granularität der Neutrophilen reichlich, groß, intensiv gefärbt und wird als toxisch (oder toxogen) bezeichnet. Manchmal finden sich in Blutausstrichen verschwommene Flecken, die wie die Kernsubstanz von Leukozyten gefärbt sind. Dies sind die sogenannten Botkin-Gumprecht-Schatten - die Überreste von Kernchromatin, die auf eine erhöhte Zerbrechlichkeit von Leukozyten hinweisen und zu deren Zerfall führen - Leukozytolyse

99. Methodik zur Bestimmung der Blutgruppe, das Konzept des Rh-Faktors.

1. Bestimmung der Blutgruppe nach Standardseren:

Folgende Ausrüstung wird benötigt:

o zwei Sätze von Standard-Hämagglutinationsseren I (0), II (A), III (B) von Gruppen von zwei verschiedenen Serien und eine Ampulle Serum IV (AB)

o eine Flasche mit isotonischer Kochsalzlösung mit einer Pipette

o eine saubere, trockene Platte

o Objektträger aus Glas

o sterile speerförmige Nadeln zum Punktieren der Fingerpulpa

o sterile Mullbällchen,

Standard-Seren zur Bestimmung der Blutgruppe nach dem ABO-System werden mit einem bestimmten Wert hergestellt Farbkodierung: I (0) - farblos, II (A) - blau, III (B) - rot, IV (AB) - gelb. Serum wird bei einer Temperatur von 4-10 °C gelagert. Das Serum sollte leicht und transparent sein. Das Vorhandensein von Flocken, Sediment, Trübung sind Anzeichen für die Ungeeignetheit des Serums. Die ersten Anzeichen einer Agglutination sollten spätestens nach 30 s auftreten.

Die Platte wird mit einem Buntstift in 4 Quadrate geteilt und die Quadrate I (0), II (A), III (B) im Uhrzeigersinn markiert. Ein großer Tropfen Serum aus zwei Reihen der Gruppen I (0), II (A), W (B) wird mit einer Pipette auf das entsprechende Quadrat der Platte aufgetragen. Die Fingerkuppe wird mit Alkohol behandelt und die Haut mit einer Nadel punktiert. Der erste Blutstropfen wird mit einem Mulltupfer entnommen, weitere Tropfen werden in Serumtropfen in verschiedenen Ecken des Glasobjektträgers eingebracht und gründlich gemischt. Ein eingebrachter Blutstropfen sollte 5-10 mal kleiner sein als ein Tropfen Serum. Dann durch Schütteln der Platte das Blut gründlich mit Serum mischen. Vorläufige Ergebnisse werden nach 3 Minuten ausgewertet, danach wird ein Tropfen isotonische Kochsalzlösung zugegeben, erneut durch Schütteln der Platte gemischt und nach 5 Minuten erfolgt die endgültige Auswertung der Agglutinationsreaktion.

Bei einer positiven Reaktion der Isohämagglutination lösen sich Flocken und Körner von verklebten Erythrozyten nicht, wenn eine isotonische Kochsalzlösung zugegeben und gemischt wird.

Bei einer negativen Reaktion sind Serumtropfen auf einer Platte gleichmäßig transparent Pinke Farbe, enthalten keine Flocken und Körner.

Die folgenden 4 Kombinationen von Agglutinationsreaktionen mit Standardseren der Gruppen I (0), II (A), III (B) sind möglich.

v Alle 3 Seren in beiden Reihen agglutinierten nicht. Getestetes Blut -

v Die Reaktion der Isohämagglutination ist bei den Serumgruppen P (A) beider Serien negativ und bei den Serengruppen I (0) und III (B) positiv. Untersuchtes Blut -

II (A) Gruppen.

v Die Reaktion der Isohämagglutination ist negativ mit Serum der Gruppen III (B) in beiden Serien und positiv mit Serum der Gruppen I (0) und II (A). Getestetes Blut -

III (B)-Gruppen.

v Die Serumgruppen I (0), II (A), III (B) zeigen in beiden Serien eine positive Reaktion. Blut gehört zur Gruppe IV (AB). Bevor jedoch eine solche Schlussfolgerung gezogen werden kann, muss eine Isohämagglutinationsreaktion mit Standardserum der Gruppe IV (AB) nach derselben Methode durchgeführt werden. Die negative Reaktion der Isohämagglutination ermöglicht es, das untersuchte Blut endgültig der Gruppe IV (AB) zuzuordnen.

2. Das Konzept des Rh-Faktors.

In Erythrozyten wurde ein weiteres Antigen (Agglutinogen) gefunden, das als Rh-Faktor (Rh) bezeichnet wurde. Alle Menschen werden in Personen mit Rh-positivem (Rh+) und Rh-negativem (Rh) Blut eingeteilt. Es wurde festgestellt, dass 85% der Menschen in Erythrozyten den Rh-Faktor enthalten, dh ihr Blut ist Rh-positiv, und 15% enthalten ihn nicht, dh das Blut dieser Menschen ist Rh-negativ. Es gibt keine Anti-Rh-Agglutinine (fertige Antikörper) im Blut gegen den Rh-Faktor (Rh-Antigen). Solche Antikörper erscheinen im Blutserum nur als Ergebnis der Immunisierung einer Person mit Rh-negativem Blut mit Rh-positiven roten Blutkörperchen. Eine solche Immunisierung erfolgt als Ergebnis wiederholter Transfusionen von Rh-positivem Blut an einen Rh-negativen Empfänger oder während der Schwangerschaft einer Frau mit Rh-negativem Blut an einen Rh-positiven Fötus. Auf diese Weise immunisierte Menschen werden sensibilisiert: Wenn sie mit Rh-positivem Blut transfundiert werden, entwickelt sich eine schwere Komplikation - ein Hämotransfusionsschock.

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Leukozyten. Die Norm ist (4–9) x109 / l Blut. Ihre Anzahl hängt von der Bildungsrate in den Lymphknoten, der Milz und dem Knochenmark, der Mobilisierung aus dem Knochenmark, der Verwendung und Migration in Gewebe, dem Einfangen durch Lunge und Milz und physiologischen Faktoren ab. Die Hauptfunktion von Granulozyten (hauptsächlich Neutrophilen) ist phagozytisch - das Einfangen und Verdauen von Fremdmaterial mit Hilfe von hydrolytischen Enzymen. Bei der Beurteilung der Anzahl der Leukozyten in der Klinik wird die Leukozytenformel verwendet - der Prozentsatz der einzelnen Formen von Leukozyten. Normalerweise ist dieser Wert konstant.

Leukozyten-Formel

Eine Zunahme der Leukozytenzahl bis zu mehreren Zehntausend deutet darauf hin Leukozytose und wird bei akuten entzündlichen und infektiösen Erkrankungen beobachtet, begleitet von einer Verschiebung der Leukozytenformel nach links. Ein Anstieg der Leukozytenzahl auf mehrere Hunderttausend weist auf eine Leukämie hin. Bei schweren Infektionskrankheiten ändert sich die Morphologie der Neutrophilen: Degranulation, Vakuolisierung usw. Eine Abnahme der Leukozytenzahl unter 4000 weist darauf hin Leukopenie meistens Agranulozytose. Eine Abnahme der Anzahl weißer Blutkörperchen kann mit der Einnahme verschiedener Medikamente, erhöhtem radioaktivem Hintergrund, Verstädterung usw. in Verbindung gebracht werden. Neutropenie manifestiert sich unter dem Einfluss von Zytostatika, bei Lupus, rheumatoider Arthritis, Malaria, Salmonellose, Brucellose, als spezifisches Syndrom - bei AIDS und Bestrahlung.

Leukozyten sind neutrophil. Der Inhalt im Blut - 50-75% (2,2-4,2) x109 / l. Durchmesser –10–12 µm.

Der Kern ist kompakt, besteht aus 3–4 Segmenten, die durch Brücken verbunden sind; Zytoplasma mit reichlicher Körnigkeit. Bei Infektionen und Entzündungen übernehmen Neutrophile die Funktion von Makrophagen - Zellen, die zur Phagozytose befähigt sind.

Eosinophile Leukozyten. Die Norm ist 1–5% der Leukozyten, (0,1–0,3) x109 / l. Zellen sind größer als Neutrophile, Durchmesser bis zu 12 Mikrometer. Der Kern besteht normalerweise aus 2-3 Segmenten. Das Zytoplasma ist leicht basophil, enthält große, hell gefärbte Eosin-Körnchen, die positive Oxidase-, Peroxidase-, Cytochrom-Oxidase-, Succinat-Dehydrogenase- und saure Phosphatase-Reaktionen ergeben. Sie sind in der Lage zu phagozytieren, nehmen an der Entgiftung von Proteinprodukten und allergischen Reaktionen des Körpers teil.Eosinophilie ist charakteristisch für Helminthiasen, es ist im Stadium der Genesung von Infektionskrankheiten möglich.

Leukozyten sind basophil. Der Gehalt im Blut beträgt 0-1% (bis zu 0,06x109 / l). Durchmesser von 8 bis 12 Mikron. Der Kern ist breit und unregelmäßig geformt. Das Zytoplasma enthält eine große Körnigkeit, die metachromatisch in violett-schwarzen Tönen gefärbt ist. Beteiligen Sie sich an allergischen Reaktionen (sofortige und verzögerte Typen): produzieren Sie Histamin und Heparin (eine Gruppe von Heparinozyten).

Monozyten/Makrophagen. Die Norm ist 2–10% der Leukozyten, (0,2–0,55) x109 / l. Größen von 12 bis 20 Mikron. Der Kern ist groß, locker und weist eine ungleichmäßige Chromatinverteilung auf. Sie zirkulieren für kurze Zeit im Blut, gelangen in Gewebe, verwandeln sich in Makrophagen und können sich amöboid bewegen. Leitzellen der körpereigenen Immunantwort. Die Hauptfunktion ist die Endozytose. Sie sind das zentrale Glied des mononukleären Phagozytensystems. Sie erfüllen eine Reihe von Zytokin-abhängigen Funktionen: hämatopoetisch, immunstimulierend, entzündungsfördernd, immunsuppressiv und entzündungshemmend.

Makrophagen-Sekretionsprodukte:

Proteasen: Plasminogenaktivator, Kollagenase, Elastase, Angiotensinkonvertase.

Entzündungsmediatoren und Immunmodulation: Interleukin-1 (IL-1), Tumornekrosefaktor α, Interferon γ, Lysozym, neutrophilenaktivierender Faktor, Komplementkomponenten C1, C2, C3, C5, Properdin, Faktoren B, D, IL-3, IL-6, IL- 8, IL-10, IL-12, IL-15.

Wachstumsfaktoren: CSF-GM, CSF-G, CSF-M, Fibroblasten-Wachstumsfaktor, transformierender Wachstumsfaktor.

Gerinnungsfaktor- und Fibrinolysehemmer: V, VII, IX, X, Plasminogen-Inhibitoren, Plasmin-Inhibitoren.

Klebstoffe: Fibronektin, Thrombospondin, Proteoglykane.

Methode der Kammerzählung

Es gibt viel weniger Leukozyten als Erythrozyten (1-2 pro großes Quadrat), daher erfolgt die Zählung aus Gründen der Genauigkeit in 100 großen Quadraten (nicht markiert).

Berechnung: in 100 großen Quadraten (1600 kleine) a wurden Leukozyten gezählt. Wenn man sich daran erinnert, dass das Volumen eines kleinen Quadrats 1/4000 mm 3 beträgt und das Blut 20-mal verdünnt wird, wird die Anzahl der Leukozyten in 1 μl Blut berechnet: 4000 * 20 und geteilt durch 1600 = a * 1/2. Um den tatsächlichen Leukozytengehalt in 1 μl Blut zu erhalten, reicht es in der Praxis aus, die bei der Berechnung erhaltene Zahl zu halbieren und 2 Nullen zuzuweisen. Der durchschnittliche Fehler der Methode beträgt ± 7 %.

12. Funktionen von Granulozyten. Die Rolle von T- und B-Lymphozyten bei der Schaffung spezifischer Immunitätsmechanismen:

Hauptzellen Immunsystem sind T- und B-Lymphozyten, die im Blutkreislauf und im Lymphsystem zirkulieren, sich ständig von einem Teil des Immunsystems zum anderen bewegen und die Fähigkeit haben, in das Gewebe einzudringen, um Schutzfunktionen zu erfüllen (Abb. 1).

An Schutzreaktionen der spezifischen Immunität sind neben T- und B-Lymphozyten Phagozyten (Granulozyten, Monozyten, Makrophagen), "natürliche Killer", Mastzellen, Endothel- und Epithelzellen beteiligt, die die Rolle von Hilfszellen spielen und mit T- und B-Lymphozyten.

Die Immunantwort besteht aus einer komplexen Reihe von zellulären Wechselwirkungen, die durch das Eindringen von fremdem antigenem Material in den Körper aktiviert werden. Zuerst fängt der Makrophage den antigentragenden Organismus ein. Dann spaltet der Makrophage einen Teil des Antigens (Peptid) ab und bringt es an seine Oberfläche, als würde er es Immunzellen präsentieren. Die Aktivierung eines Lymphozyten durch Antigen führt zur Proliferation und Transformation von Lymphozyten.

Lymphozyten sind die einzigen Zellen im Körper, die eigene und fremde Antigene spezifisch erkennen und auf Kontakt mit einem spezifischen Antigen mit Aktivierung reagieren können. Lymphozyten mit sehr ähnlicher Morphologie werden in zwei Populationen unterteilt, die unterschiedliche Funktionen haben und unterschiedliche Proteine produzieren.

Eine der Populationen wurde benannt B-Lymphozyten. Beim Menschen reifen B-Lymphozyten im Knochenmark heran. B-Lymphozyten erkennen Antigene durch spezifische Rezeptoren einer Immunglobulin-Natur, die, wenn B-Lymphozyten reifen, auf ihren Membranen erscheinen. B-Lymphozyten sind in der Lage, protein-, polysaccharid- und lipoproteinlösliche Antigene zu erkennen und zu binden.Die Hauptfunktion von B-Lymphozyten ist die spezifische Erkennung eines Antigens. Die Erkennung des Antigens führt zur Aktivierung, Proliferation und Umwandlung von B-Lymphozyten in Plasmazellen - Produzenten spezifischer Antikörper - Immunglobuline. So gebildet humorale Immunantwort. Am häufigsten benötigen B-Lymphozyten die Hilfe von T-Lymphozyten in Form der Produktion von aktivierenden Zytokinen, um eine humorale Immunantwort zu entwickeln.

Eine andere Population wurde im Zusammenhang mit der Differenzierung ihrer Vorläufer im Thymus T-Lymphozyten genannt. T-Lymphozyten erfüllen die wichtigste Funktion der spezifischen Erkennung und Antigenbindung. Durch Antigene aktivierte T-Lymphozyten vermehren sich und werden zu verschiedenen Subpopulationen, die weiter an allen Formen der Immunantwort teilnehmen. Ein aktivierter T-Lymphozyten produziert und sekretiert auch Zytokine, die die Prozesse zur Erhöhung der Anzahl von T-Lymphozyten selbst, B-Lymphozyten und Makrophagen verstärken.

Unter reifen T-Lymphozyten werden zwei Hauptsubpopulationen unterschieden: T-Helfer (CD4+) und T-Killer – zytotoxische T-Lymphozyten (CD8+). Die Kennzeichnung „CD“ ist ein Merkmal des „Oberflächenzell-Phänotyps“ – „Cluster of Differentiation“ (von den englischen Clusters of Differentiation – CD).

Es gibt eine andere Art von Lymphozyten - große körnige Lymphozyten, die sich von kleineren T- und B-Lymphozyten nicht nur in strukturellen Merkmalen unterscheiden, sondern auch in Abwesenheit eines Antigen-erkennenden Rezeptors. Diese Zellen werden aufgerufen "natürliche Killer": Sie sind in der Lage, mit verschiedenen Viren infizierte Zielzellen oder Tumorzellen abzutöten (siehe Tabelle 1).

Tabelle 1. Klassifikation menschlicher Lymphozyten

T-Zellen zerstörerische Wirkung auf folgende Objekte:

1. Bösartige Zellen.

2. Mit Mikroorganismen infizierte Zellen.

3. Transplantierte Organe und Gewebe.

Die ganze Zelle ist an dem Angriff beteiligt, so wird die Antwort genannt zelluläre Immunität.

Daher gibt es zwei Haupttypen von Immunantworten:

· Zelluläre Immunität es ist eine Funktion von T-Lymphozyten.

· humorale Immunität- unter Beteiligung von B-Lymphozyten.

Es gibt eine weitere Subpopulation von T-Lymphozyten: regulatorische T-Lymphozyten, T-regulatorische Zellen (Treg), T-Suppressoren- zentrale Regulatoren der Immunantwort. Ihre Hauptfunktion besteht darin, die Stärke und Dauer der Immunantwort durch die Regulierung der Funktion von T-Effektorzellen (T-Helfer- und T-zytotoxische Zellen) zu steuern.

Reis. 2. Allgemeines Schema der Immunantwort

Das Phänomen der Unterdrückung der Immunantwort ist seit langem bekannt, seine Mechanismen waren jedoch nicht bekannt. Daher wurde die Existenz spezifischer T-Suppressor-Zellen vermutet, aber die Existenz dieser Zellen wurde lange Zeit nicht experimentell bestätigt. Erst in den späten 1990er und frühen 2000er Jahren wurde gezeigt, dass bestimmte T-Zellen einen CD25+FOXP3+-Phänotyp haben und die Immunantwort wirksam unterdrücken.

13. Immunität, ihre unspezifischen und spezifischen Mechanismen:

Adaptiv ( obsolet erworbene, spezifische) Immunität hat die Fähigkeit, einzelne Antigene zu erkennen und darauf zu reagieren, ist durch eine klonale Reaktion gekennzeichnet, lymphoide Zellen sind an der Reaktion beteiligt, es gibt ein immunologisches Gedächtnis und Autoaggression ist möglich.

in aktiv und passiv eingeteilt.

Erworbene aktive Immunität tritt nach einer Krankheit oder nach Verabreichung eines Impfstoffs auf.
Erworbene passive Immunität entwickelt sich, wenn fertige Antikörper in Form von Serum in den Körper eingebracht oder mit dem Kolostrum der Mutter oder in utero auf ein Neugeborenes übertragen werden.

Eine andere Klassifizierung unterteilt die Immunität in natürliche und künstliche.

Die natürliche Immunität umfasst angeborene und erworbene aktive (nach einer Krankheit) sowie passive Immunität, wenn Antikörper von der Mutter auf das Kind übertragen werden.
Künstliche Immunität umfasst erworbene aktive nach Impfung (Impfung) und erworbene passive (Serumverabreichung).

Die angeborene (unspezifische) Immunität beruht auf der Fähigkeit, eine Vielzahl von Krankheitserregern gemäß den konservativsten gemeinsamen Merkmalen für sie, der Entfernung der evolutionären Verwandtschaft, vor dem ersten Treffen mit ihnen zu identifizieren und zu neutralisieren. 2011 wurde der Nobelpreis für Medizin und Physiologie für die Erforschung neuer Mechanismen der angeborenen Immunität verliehen (Ralph Steinman, Jules Hoffman und Bruce Boettler).

Es wird hauptsächlich von Zellen der myeloiden Reihe durchgeführt, hat keine strenge Spezifität für Antigene, hat keine klonale Reaktion und hat keine Erinnerung an den ersten Kontakt mit einem fremden Agens.

14. Mononukleär-phagozytisches System:

Mononukleäres Phagozytensystem(griech. monox one + lat. nucleos nucleus: griech. phagos verschlingend, aufnehmend + gistol. sutus-Zelle; synonym: Makrophagensystem, Monozyten-Makrophagen-System) - ein physiologisches Abwehrsystem von Zellen, die die Fähigkeit besitzen, Fremdstoffe aufzunehmen und zu verdauen. Die Zellen, aus denen dieses System besteht, haben einen gemeinsamen Ursprung, zeichnen sich durch morphologische und funktionelle Ähnlichkeiten aus und sind in allen Geweben des Körpers vorhanden.

Die Grundlage des modernen Konzepts des Systems mononukleärer Phagozyten ist die von I.I. Mechnikov am Ende des 19. Jahrhunderts und die Lehre des deutschen Pathologen Aschoff (K. A. L. Aschoff) über das retikuloendotheliale System (RES). Zunächst wurde RES morphologisch als System von Körperzellen identifiziert, die in der Lage sind, den lebenswichtigen Farbstoff Karmin anzureichern. Auf dieser Grundlage wurden bindegewebige Histiozyten, Blutmonozyten, Leber-Kupffer-Zellen sowie retikuläre Zellen hämatopoetischer Organe, Endothelzellen von Kapillaren, Nebenhöhlen des Knochenmarks und Lymphknoten dem RES zugeordnet. Mit der Anhäufung von neuem Wissen und Verbesserung morphologische Methoden Forschungsarbeiten wurde deutlich, dass die Vorstellungen über das retikuloendotheliale System vage, nicht spezifisch und in einer Reihe von Bestimmungen einfach falsch sind. So zum Beispiel retikuläre Zellen und Endothel der Nebenhöhlen des Knochenmarks und der Lymphknoten lange Zeit die Rolle einer Quelle von Fresszellen wurde zugeschrieben, was sich als falsch herausstellte.

Es wurde nun festgestellt, dass mononukleäre Phagozyten von zirkulierenden Blutmonozyten abstammen. Monozyten reifen im Knochenmark, gelangen dann in den Blutkreislauf, von wo aus sie in Gewebe und seröse Höhlen wandern und zu Makrophagen werden. Retikuläre Zellen erfüllen eine Stützfunktion und bilden die sogenannte Mikroumgebung für hämatopoetische und lymphoide Zellen. Endothelzellen übernehmen den Stofftransport durch die Wände der Kapillaren. Retikuläre Zellen und vaskuläres Endothelium stehen nicht in direktem Zusammenhang mit dem Schutzsystem der Zellen. 1969 wurde auf einer dem Problem des RES gewidmeten Konferenz in Leiden das Konzept des "retikuloendothelialen Systems" als obsolet anerkannt. Stattdessen wird das Konzept des "Systems mononukleärer Phagozyten" angenommen. Dieses System umfasst Histiozyten des Bindegewebes, Kupffer-Zellen der Leber (sternförmige Retikuloendotheliozyten), Alveolarmakrophagen der Lunge, Makrophagen der Lymphknoten, Milz, Knochenmark, Pleura- und Peritonealmakrophagen, Osteoklasten des Knochengewebes, Mikroglia des Nervengewebes , Synoviozyten der Synovialmembranen, Langergais-Zellen der Haut, nicht pigmentierte körnige Dendrozyten. Es gibt kostenlose, d.h. sich durch Gewebe bewegen, und fixierte (residente) Makrophagen, die einen relativ dauerhaften Platz haben.

Makrophagen von Geweben und serösen Hohlräumen haben laut Rasterelektronenmikroskopie eine nahezu kugelförmige Form mit einer ungleichmäßig gefalteten Oberfläche, die von der Plasmamembran (Cytolemma) gebildet wird. Unter Kultivierungsbedingungen breiten sich Makrophagen auf der Oberfläche des Substrats aus und nehmen eine abgeflachte Form an, und wenn sie sich bewegen, bilden sie multiple polymorphe Pseudopodien.

Ein charakteristisches ultrastrukturelles Merkmal eines Makrophagen ist das Vorhandensein zahlreicher Lysosomen und Phagolysosomen oder Verdauungsvakuolen in seinem Zytoplasma. Lysosomen enthalten verschiedene hydrolytische Enzyme, die für die Verdauung des absorbierten Materials sorgen. Makrophagen sind aktive sekretorische Zellen, die Enzyme, Inhibitoren und Komplementkomponenten in die Umgebung abgeben. Das Hauptsekretionsprodukt von Makrophagen ist Lysozym. Aktivierte Makrophagen sezernieren neutrale Proteinasen (Elastase, Kollagenase), Plasminogenaktivatoren, Komplementfaktoren wie C2, C3, C4, C5 und Interferon.

Zellen des mononukleären Phagozytensystems haben eine Reihe von Funktionen, die auf ihrer Fähigkeit zur Endozytose beruhen, d.h. Absorption und Verdauung von Fremdpartikeln und kolloidalen Flüssigkeiten. Dank dieser Fähigkeit erfüllen sie eine Schutzfunktion. Durch Chemotaxis wandern Makrophagen zu den Infektions- und Entzündungsherden, wo sie die Phagozytose von Mikroorganismen, deren Abtötung und Verdauung durchführen. Bei chronischen Entzündungen können spezielle Formen von Phagozyten auftreten - Epitheloidzellen (z. B. bei einem infektiösen Granulom) und mehrkernige Riesenzellen vom Pirogov-Langhans-Zelltyp und vom Fremdkörperzelltyp. die durch die Verschmelzung einzelner Fresszellen zu einem Polykaryon - einer mehrkernigen Zelle - entstehen. In Granulomen produzieren Makrophagen das Glykoprotein Fibronektin, das Fibroblasten anlockt und zur Entstehung von Sklerose beiträgt.

Zellen des Systems mononukleärer Fresszellen nehmen an Immunprozessen teil.

Eine unabdingbare Voraussetzung für die Entwicklung einer gerichteten Immunantwort ist daher die primäre Interaktion eines Makrophagen mit einem Antigen. In diesem Fall wird das Antigen vom Makrophagen absorbiert und in eine immunogene Form verarbeitet. Die Immunstimulation von Lymphozyten erfolgt durch direkten Kontakt mit einem Makrophagen, der ein umgewandeltes Antigen trägt. Die gesamte Immunantwort erfolgt als komplexe mehrstufige Interaktion von G- und B-Lymphozyten mit Makrophagen.

Makrophagen haben eine Antitumoraktivität und zeigen zytotoxische Eigenschaften gegenüber Tumorzellen. Besonders ausgeprägt ist diese Aktivität bei den sogenannten Immunmakrophagen, die bei Kontakt mit sensibilisierten T-Lymphozyten, die zytophile Antikörper (Lymphokine) tragen, Tumorzielzellen lysieren.

Die Zellen des Systems der mononukleären Phagozyten sind an der Regulation der myeloiden und lymphoiden Hämatopoese beteiligt. So bilden sich hämatopoetische Inseln im roten Knochenmark, in der Milz, in der Leber und im Dottersack des Embryos um eine spezielle Zelle - den zentralen Makrophagen, der die Erythropoese der erythroblastischen Insel organisiert. Kupffer-Zellen der Leber sind an der Regulation der Hämatopoese beteiligt, indem sie Erythropoietin produzieren. Monozyten und Makrophagen produzieren Faktoren, die die Produktion von Monozyten, Neutrophilen und Eosinophilen stimulieren. In der Thymusdrüse (Thymus) und den Thymus-abhängigen Zonen lymphoider Organe wurden die sogenannten interdigitierenden Zellen gefunden - spezifische Stromaelemente, die auch mit den Systemen mononukleärer Phagozyten verwandt sind und für die Migration und Differenzierung von Lymphozyten verantwortlich sind.

Die Stoffwechselfunktion von Makrophagen ist ihre Beteiligung am Eisenstoffwechsel.

In Milz und Knochenmark führen Makrophagen Erythrophagozytose durch, während sie Eisen in Form von Hämosiderin und Ferritin anreichern, das von Erythroblasten wiederverwendet werden kann.

15. Leukozyten und ihre Typen. Leukopenie:

Leukozyten-Formel- Dies ist der Prozentsatz bestimmter Arten von Leukozyten im peripheren Blut. Die Leukozytenformel wird auf eine bestimmte Weise modifiziert, die für jede spezifische Krankheit typisch ist. Leukozyten bei verschiedene Krankheiten, häufiger bei Infektionen, ändern sich quantitativ.

Eine Zunahme der Leukozytenzahl ist Leukozytose, eine Abnahme ist Leukopenie.

Leukozytose kann physiologisch und pathologisch sein, die erste tritt auf gesunde Menschen, die zweite - in einigen schmerzhaften Zuständen. Leukozytose - Veränderung zelluläre Zusammensetzung Blut, gekennzeichnet durch eine Zunahme der Leukozytenzahl. Die Norm für Leukozyten im Blut beträgt 3,5 - 8,8 × 109 / l, diese Zahl kann jedoch je nach Labor und verwendeten Methoden nach oben oder unten variieren.

Leukozytose kann physiologisch und pathologisch sein, die erste tritt bei gesunden Menschen auf, die zweite bei einigen Krankheitszuständen. Zu den physiologischen gehören alimentäre Leukozytose (nach dem Essen), myogene (nach körperlicher Anstrengung), Leukozytose schwangerer Frauen usw. Pathologische Leukozytose wird durch die Reaktion hämatopoetischer Organe auf Reizungen verursacht, die durch infektiöse, toxische, eitrig-entzündliche, Strahlung und andere Mittel verursacht werden. Es wird auch bei Gewebenekrosen (Myokardinfarkt, Tumorzerfall), nach größeren Blutungen, Verletzungen, Schädel-Hirn-Traumen usw. beobachtet. In der Regel verschwindet die Leukozytose zusammen mit der Ursache, die sie verursacht hat. Eine vorübergehende Leukozytose, die durch das Auftreten unreifer Leukozyten im Blut gekennzeichnet ist, wird als leukämoide Reaktion bezeichnet.

Leukopenie- eine Abnahme der Leukozytenzahl im Blut bei bestimmten Infektions- und anderen Krankheiten sowie als Folge von Strahlenschäden, Medikamenten oder Reflexwirkungen auf das Knochenmark.

Strahlenschäden, Kontakt mit einer Reihe von Chemikalien (Benzol, Arsen, DDT usw.) führen zu Leukopenie; Einnahme von Medikamenten (Zytostatika, einige Arten von Antibiotika, Sulfonamide usw.). Leukopenie tritt bei viralen und schweren bakteriellen Infektionen, Erkrankungen des Blutsystems auf.

Bei Leukopenie ist es notwendig, die Ursache der Krankheit genau zu bestimmen. Neben Virusinfektionen und Erkrankungen der hämatopoetischen Organe kann Leukopenie die Ursache sein Nebeneffekt allopathische Arzneimittel, da eine Reihe von Arzneimitteln eine toxische Wirkung auf das Knochenmark haben und über allergische Mechanismen Leukopenie und Agranulozytose verursachen können.

Die Behandlung besteht aus der Verschreibung von Medikamenten, die die Entwicklung neuer weißer Blutkörperchen oder die Freisetzung heranreifender weißer Blutkörperchen stimulieren.

16. Regulation der Leukopoese:

Regulation der Leukopoese. Die Produktion von Leukozyten wird durch Leukopoetine stimuliert, die nach der schnellen Entfernung einer großen Anzahl von Leukozyten aus dem Blut auftreten. Die chemische Natur und der Ort der Bildung von Leukopoetinen im Körper wurden noch nicht untersucht. Die Leukopoese wird durch Nukleinsäuren, Gewebeabbauprodukte, die entstehen, wenn sie beschädigt und entzündet sind, und einige Hormone stimuliert. Unter der Wirkung von Hypophysenhormonen - adrenocorticotropes Hormon und Wachstumshormon - steigt die Anzahl der Neutrophilen und die Anzahl der Eosinophilen im Blut nimmt ab.

spielt eine wichtige Rolle bei der Stimulierung der Leukopoese Nervensystem. Eine Reizung der sympathischen Nerven führt zu einem Anstieg der neutrophilen Leukozyten im Blut. Eine längere Reizung des Vagusnervs führt zu einer Umverteilung von Leukozyten im Blut: Ihr Gehalt nimmt im Blut der Mesenterialgefäße zu und im Blut der peripheren Gefäße ab; Irritation u emotionale Erregung die Anzahl der Leukozyten im Blut erhöhen. Nach dem Essen steigt der Gehalt an Leukozyten im Blut, das in den Gefäßen zirkuliert. Unter diesen Bedingungen sowie bei Muskelarbeit und schmerzhaften Reizen gelangen Leukozyten, die sich in der Milz und den Nebenhöhlen des Knochenmarks befinden, in die Blutbahn.

Die Anzahl der Blutleukozyten kann in einer Burker-Zählkammer mit Goryaev-Gitter oder in elektronischen Analyseautomaten („Celloscope“, „Kulter“, „Technikan“) gezählt werden.

Zähltechnik in Burkers Kammer mit Goryaevs Gitter

Methodenprinzip:Ähnlich wie bei einer solchen Erythrozytenzählung liegt ihr Wesen in der genauen Messung von Blut und seiner Verdünnung in einem bestimmten Flüssigkeitsvolumen, gefolgt von der Zählung der Zellelemente in einer Zählkammer und der Neuberechnung des mit 1 Blut erhaltenen Ergebnisses.

Ausrüstung und Reagenzien:

Mixer oder Reagenzgläser zum Zählen von Leukozyten;

3%ige Essigsäurelösung, der einige Tropfen Methylviolett oder Methylenblau zugesetzt werden;

Zählkammer;

Mikroskop.

Der Mischer für Leukozyten unterscheidet sich von dem für Erythrozyten dadurch, dass er ein breiteres Kapillarlumen und ein kleineres Reservoir hat. Am Mischer sind drei Markierungen angebracht: 0,5, 1,0 und 11. Dadurch können Sie das Blut 10- oder 20-mal verdünnen (häufiger wird es 20-mal verdünnt).

Forschungsfortschritt: Bei der Blutentnahme zur Leukozytenzählung werden zunächst die Blutreste mit einem Wattestäbchen von der Haut entfernt und durch leichtes Drücken des Fingers wird ein frischer Blutstropfen freigesetzt. Beim Arbeiten mit Mischern Blut bis zur Marke 0,5 aufsaugen, dann mit 3%iger Essigsäurelösung bis zur Marke 11 verdünnen. 3 Minuten kräftig schütteln, dann 1-2 Tropfen abtropfen lassen und die Zählkammer füllen. Wenn Sie mit Reagenzgläsern zum Zählen von Leukozyten arbeiten, gießen Sie 0,4 ml einer 3% igen Essigsäurelösung und geben Sie 0,02 ml Blut hinein, gemessen mit einer Pipette aus einem Saly-Hämometer. Schütteln Sie die Reagenzgläser gründlich, senken Sie dann die Pipette in die Flüssigkeit und füllen Sie nach dem Sammeln des Inhalts die Zählkammer. Da es viel weniger Leukozyten als Erythrozyten gibt, wird die Berechnung in 100 großen (unmarkierten) Quadraten durchgeführt, um ein zuverlässiges und genaues Ergebnis zu erhalten. Normalerweise gibt es 1-2 Leukozyten in einem großen Quadrat. Die Anzahl der Leukozyten in 1 µl Blut wird analog zur Berechnung der Anzahl der Erythrozyten nach der Formel berechnet

X \u003d (A x 4000 x C) / B,

wobei X die Anzahl der Leukozyten in 1 µl Blut ist; A - die Anzahl der in 1600 kleinen Quadraten gezählten Leukozyten; B - die Anzahl der gezählten kleinen Quadrate (1600); 4000 ist der Wert, multipliziert mit dem wir die Anzahl der Zellen in 1 µl erhalten.

Interpretation der empfangenen Daten. Normale Anzahl weißer Blutkörperchen: 4,0 - 9,0 x 10 9 /l. Eine Abnahme ihrer Anzahl im Blut wird als Leukopenie bezeichnet, eine Zunahme als Leukozytose.

Leukozytose kann absolut (wahr) und relativ (umverteilend) sein.

Absolute Leukozytose - beobachtet bei akuten Entzündungsprozessen, Gewebenekrose, akuten bakteriellen Infektionen (mit Ausnahme von Typhus, Brucellose, Tularämie usw.), allergischen Zuständen, bösartigen Tumoren (mit Gewebezerstörung), geschlossene Verletzungen Schädel- und Hirnblutungen, diabetisches und urämisches Koma, Schock, akuter Blutverlust, als Primärreaktion - mit Strahlenkrankheit. Bei Leukämie kommt es zu einem deutlichen Anstieg der Leukozytenzahl.

Relativ (Umverteilung) ist eine Folge des Eintritts von Leukozyten in den Blutkreislauf aus den Organen, die als Depot dafür dienen. Dies geschieht nach Mahlzeiten (Nahrungsleukozytose), heißen und kalten Bädern, starken Emotionen (vegetativ-vaskuläre Leukozytose), intensiver Muskelarbeit (myogene Leukozytose) usw.

Leukopenie. Leukopenie gilt als Indikator für die Hemmung der Funktionsfähigkeit des Knochenmarks infolge der Exposition gegenüber toxischen Substanzen (Arsen, Benzol usw.), bestimmten Medikamenten (Sulfonamide, Levomycetin, Butadion, Immuran, Cyclophosphamid usw.), Viren (Grippe, Virushepatitis, Masern usw.), Mikroben (Typhus, Brucellose usw.), ionisierende Strahlung, Röntgenstrahlen und Hypersplenismus (erhöhte Milzfunktion).

Leukozytose und Leukopenie sind selten durch eine proportionale Zunahme (Abnahme) der Gesamtzahl von Leukozyten aller Art gekennzeichnet (z. B. Leukozytose mit Blutverdickung); in den meisten Fällen kommt es zu einer Zunahme (Abnahme) der Zahl eines beliebigen Zelltyps, daher die Begriffe „Neutrophilie“, „Neutropenie“, „Lymphozytose“, „Lymphopenie“, „Eosinophilie“, „Eosinopenie“, „Monozytose“ , "Monozytopenie" verwendet werden, "Basophilie".

Bei der klinischen Beurteilung von Veränderungen in der Anzahl der Leukozyten sehr wichtig wird der Prozentsatz der einzelnen Formen von Leukozyten angegeben, dh die Leukozytenformel.

Die Leukozytenformel des Blutes eines gesunden Menschen:

Relative Menge Absolute Menge

Basophile ……………………….0-1% 0-0,0650 x 10 9 /l

Eosinophile …………………….0,5-5% 0,02-0,30 x 10 9 /l

Neutrophile: - Myelozyten …………0 % fehlen

Metamyelozyten……0% fehlen

Stich ...... 1-6% 0,040-0,300 x 10 9 / l

Segmentiert ... 0,47-72 % 2,0-5,5 x 10 9 / l

Lymphozyten ……………………….19-37% 1,2-3,0 x 10 9 / l

Monozyten ………………………….3-11 % 0,09-0,6 x 10 9 /l

Die Zählung der Leukozytenformel erfolgt in gefärbten Abstrichen des peripheren Blutes. Für die korrekte Interpretation der Ergebnisse der Untersuchung der Leukozytenformel wird empfohlen, in absoluten Mengen und nicht in relativen Mengen zu zählen. Die gebräuchlichsten Methoden zum Färben von Ausstrichen nach Romanovsky-Giemsa, nach Pappenheim. Unter Immersion werden mindestens 200 Zellen betrachtet und daraus der prozentuale Anteil einzelner Leukozytenarten abgeleitet. Die Analyse des Leukogramms unter Berücksichtigung anderer Blutparameter und des Krankheitsbildes ist eine wertvolle Untersuchungsmethode, sie hilft bei der Diagnose und Bestimmung der Prognose der Krankheit.

Die Hauptursachen für Neutrophilie.

Akute bakterielle Infektionen - lokalisiert und generalisiert.

Entzündung oder Gewebenekrose.

Myeloproliferative Erkrankungen.

Rausch.

Medizinische Wirkungen (Kortikosteroide).

Akute Blutungen.

Die Hauptursachen für Neutropenie.

Infektionen - bakteriell (Typhus, Brucellose, Tularämie, Paratyphus) und viral (infektiöse Hepatitis, Masern, Influenza, Röteln und andere).

Myelotoxische Wirkungen und Unterdrückung der Granulozytopoese ( ionisierende Strahlung; chemische Mittel - Benzol, Anilin, DDT; medizinische Wirkungen - Zytostatika und Immunsuppressiva; Vitamin B 12 - Folatmangelanämie, akute aleukämische Leukämie, aplastische Anämie).

Die Auswirkungen von Antikörpern (Immunformen) - Überempfindlichkeit gegen Medikamente, Autoimmunerkrankungen (SLE, rheumatoide Arthritis, chronische lymphatische Leukämie), isoimmune Manifestationen (hämolytische Erkrankung des Neugeborenen).

Umverteilung und Ablagerung in Organen - Schockzustände, Erkrankungen mit Splenomegalie und Hypersplenismus.

Erbliche Formen (familiäre gutartige chronische Neutropenie).

Die Hauptursachen der Eosinophilie.

Allergische Erkrankungen.

Chronische Hautläsionen - Psoriasis, Pemphigus, Ekzeme.

Tumore (eosinophile Varianten der Leukämie).

Andere Krankheiten - Leffler-fibroplastische Endokarditis, Scharlach.

In der Genesungsphase von Infektionen und entzündlichen Erkrankungen (gutes prognostisches Zeichen).

Ursachen der Eosinopenie (Aneosinophilie).

Erhöhte Adrenocorticosteroid-Aktivität im Körper.

Typhus-Fieber.

Die Hauptursachen der Basophilie:

Chronische myeloische Leukämie und Erythrämie.

Die Hauptursachen der Monozytose.

Subakute und chronische bakterielle Infektionen.

Hämoblastosen - Monozytenleukämie, Lymphogranulomatose, Lymphome.

Andere Erkrankungen - SLE, Sarkoidose, rheumatoide Arthritis, infektiöse Monozytose; während der Erholungsphase von Infektionen, am Ausgang der Agranulozytose, nach Splenektomie.

Die Abnahme der Monozytenzahl ist vor allem für die Beurteilung des Lymphozyten-Monozyten-Verhältnisses bei Lungentuberkulose wichtig.

Die Hauptursachen der Lymphozytose.

Infektionen - akute virale (infektiöse Mononukleose, Masern, Röteln, Windpocken), chronische bakterielle (Tuberkulose, Syphilis, Brucellose), Protozoen (Toxoplasmose).

Hämoblastosen (lymphatische Leukämie, Lymphome).

Andere Krankheiten - Hyperthyreose, Morbus Addison, Vitamin B 12 - Folsäuremangelanämie, hypo- und aplastische Anämie.

Lymphozytopenie beobachtet bei SLE, Lymphogranulomatose, weit verbreiteter Tuberkulose der Lymphknoten, im Endstadium von Nierenversagen, akuter Strahlenkrankheit, Immunschwächezuständen, Einnahme von Glukokortikoiden.

Eine Zunahme oder Abnahme der Anzahl bestimmter Arten von Leukozyten im Blut kann relativ oder absolut sein. Wenn sich nur der Prozentsatz des einen oder anderen Leukozytentyps ändert, treten relative Neutrophilien, relative Eosinopenien usw. auf. Eine Zunahme oder Abnahme des absoluten Gehalts einer beliebigen Art von Leukozyten, dh der Anzahl dieser Zellen pro Volumeneinheit Blut, wird als absolute Neutrophilie, absolute Eosinopenie usw. bezeichnet.

Die Verschiebung der Formel nach links (eine Zunahme der Anzahl junger Formen von Neutrophilen) ist ein Zeichen für eine Entzündung oder einen nekrotischen Prozess im Körper.

Eine Verschiebung der Leukozytenformel nach rechts ist charakteristisch für Strahlenkrankheit und Vitamin B 12 -Folsäuremangelanämie.

Das Fehlen oder die signifikante Abnahme der Anzahl aller Arten von körnigen Leukozyten - Granulozyten (Neutrophile, Eosinophile, Basophile) wird als Agranulozytose bezeichnet. Je nach Entstehungsmechanismus werden myelotoxische (Exposition gegenüber ionisierender Strahlung, Einnahme von Zytostatika) und immunologische (Hapten- und Autoimmunagranulozytose) unterschieden.